Preconditioning of the response to ischemia/ reperfusion-induced plasma leakage in hamster cheek pouch microcirculation

OBJECTIVE: Ischemic preconditioning and some drugs can protect tissues from injury by preserving microcirculation. This study evaluated vascular permeability in a hamster cheek pouch preparation using either short ischemic periods or bradykinin as preconditioning stimuli followed by 30 min of ischemia/reperfusion. METHOD: Sixty-six male hamsters were divided into 11 groups: five combinations of different ischemic frequencies and durations (one, three or five shorts periods of ischemia, separated by one or five minutes) with 10 min intervals between the ischemic periods, followed by 30 min ischemia/reperfusion; three or five 1 min ischemic periods with 10 min intervals between them followed by the topical application of histamine (2 µM); bradykinin (400 nM) followed by 30 min of ischemia/reperfusion; and three control groups (30 min of ischemia/reperfusion or histamine or bradykinin by themselves). Macromolecular permeability was assessed by injection of fluorescein-labeled dextran (FITC-dextran, MW= 150 kDa; 250 mg/Kg body weight), and the number of leaks/cm2 was counted using an intravital microscope and fluorescent light in the cheek pouch. RESULTS: Plasma leakage (number of leaks/cm²) was significantly reduced by preconditioning with three and five 1 min ischemic periods, one and three 5 min ischemic periods and by bradykinin. Histamine-induced macromolecular permeability was also reduced after three periods of 5 min of ischemia. CONCLUSION: Short ischemic periods and bradykinin can function as preconditioning stimuli of the ischemia/reperfusion response in the hamster cheek pouch microcirculation. Short ischemic periods also reduced histamineinduced macromolecular permeability.

Efeitos anti-hipertensivos e microcirculatórios do extrato hidro-alcóolico de echinodorus grandiflorus (chapéu de couro) em ratos espontaneamente hipertensos / Antihypertensive and microcirculatory effects of hydro-alcoholic extract of Echinoduros

A hipertensão arterial é um grande desafio para a saúde pública, e quando não tratada, predipõe à morbidade cardiovascular e morte prematura. É sabido que grande parte do aumento da resistência vascular na hipertensão é determinada no nível microvascular e evidências recentes sugerem que uma redução na densidade capilar pode contribuir significativamente para a elevação da resistência vascular e, conseqüentemente, a pressão arterial, tanto em humanos quanto em animais de experimentação. O Echinodorus grandiforus (EG), uma planta distribuídas em todo o Brasil, tem sido utilizada na medicina popular para tratar hipertensão e doenças inflamatórias. No entanto, não há estudos farmacológicos sobre os efeitos biológicos do extrato. Objetivos: Investigar os efeitos do extrato hidro-alcoólico de Echinodorus grandiflorus sobre a densidade capilar funcional e estrutural da pele, músculo esquelético e do coração em ratos espontaneamente hipertensos. Métodos: Para tanto, foram utilizados 10 Wistar-Kyoto (WKY) e 40 animais SHR. Os animais foram divididos em 5 grupos que receberam veículo (SHR, o grupo controle hipertensos e Wistar, o grupo controle normotenso) e EG (dose 50 mg/kg, 100 mg/kg e 200 mg/kg) durante 28 dias por gavagem. A pressão arterial sistólica e a freqüência cardíaca foram mensurados semanalmente por pletismografia caudal. A densidade capilar funcional foi avaliada no músculo grácil e da pele da orelha, utilizando videomicroscopia intravital após a injeção intravenosa de fluoresceína acoplado ao dextran. A densidade capilar estrutural foi estudada na musculatura esquelética e do ventrículo esquerdo, utilizando análise histológica com FITC acoplado a lectina griffonia simplicifolia, que pode identificar as células endoteliais. Resultados: o tratamento oral com EG diminuiu a pressão sanguínea sistólica em diferentes doses. O tratamento com o EG nas doses de 100 mg/kg e 200 mg/kg reverteu completamente a rarefgação capilar funcional no músculo esquelético e pele (316+- 60 e 353+- 93 capilares/mm²; 319+- 56 e 384+- 70 capilares/mm², p <0,05, respectivamente) em relação ao grupo controle hipertensos (231+- 11 e 284+- 14 capilares/mm²). A análise histológica mostrou que o grupo SHR apresentaram uma menor relação capilar/fibra no músculo esquelético (WKY + VEI 1,94+- 0,009 e SHR + VEI 1,46+- 0,05 capilar/fibra no músculo, P <0,05) e o tratamento com EG reverteu a rarefação capilar estrutural dos animais tratados com a dose de 200 mg/kgA relação capilar/fibra no ventrículo esquerdo de SHR também foi reduzida (WKY + VEI 0,27+- 0,08 e SHR + VEI 0,20+- 0,01, P <0,05). Tratamentos com EG não teve efeito na rarefação capilar estrutura do ventrículo esquerdo. Conclusão: O tratamento crônico com EG foi capaz de reduzir a pressão sistólica e capaz de reverter completamente a rarefação capilar funcional e estrutural, na dose mais alta, em animais espontaneamente hipertensos.